NIBSC93/722白(bai)介素(su)10試劑盒的(de)使(shi)用方法(fa)

　　NIBSC93/722白(bai)介素(su)10是由(you)160個(ge)氨基酸(suan)組(zu)成4個(ge)α螺旋(xuan)結(jie)構(gou)的的(de)細(xi)胞因子(zi)，分子量為(wei)18.5 kDa。在(zai)水溶液中(zhong)以二(er)聚體(ti)形式(shi)存(cun)在(zai)，分子量約為(wei)39 kDa。是(shi)個(ge)多(duo)效性(xing)的因子(zi)，能夠對多(duo)種(zhong)細(xi)胞起(qi)作用，主(zhu)要(yao)表(biao)現為(wei)免(mian)疫抑制和免(mian)疫刺激兩方面的作用，特(te)別(bie)是(shi)在(zai)調(tiao)節(jie)淋(lin)巴(ba)系(xi)和髓系的(de)細(xi)胞功(gong)能方面扮演重要(yao)的作用。IL-10 也具有(you)單(dan)核(he)細(xi)胞/巨(ju)噬(shi)細(xi)胞依(yi)賴(lai)、抗原(yuan)刺激引(yin)起(qi)的(de)的PBMNC 和 NK 細(xi)胞合(he)成其(qi)它(ta)細(xi)胞因子(zi)的(de)抑(yi)制作用。巨(ju)噬細(xi)胞膜介導的共刺激引(yin)起(qi)的(de)T細(xi)胞和(he)NK細(xi)胞活(huo)化(hua)後的產物及功(gong)能也可被IL-10所抑制。

 

　　IL-10是單(dan)核細(xi)胞/巨(ju)噬(shi)細(xi)胞功(gong)能的強(qiang)有(you)力(li)的(de)調(tiao)節(jie)物(wu)。IL-10作為(wei)細(xi)胞介導的免疫反應(ying)的抑制物，能夠抑(yi)制像(xiang)前列(lie)腺(xian)素(su)E2、TNF-α、IL-1、IL-10和 IL-8等(deng)許(xu)多(duo)引(yin)起(qi)炎(yan)癥的(de)細(xi)胞因子(zi)。IL-10 能夠促(cu)進(jin)可溶性(xing)TNF受體(ti)的(de)釋(shi)放和ICAM－1和B7在(zai)細(xi)胞表(biao)面的表(biao)達(da)。IL-10還(hai)參與B細(xi)胞、柱(zhu)狀(zhuang)細(xi)胞及胸(xiong)腺(xian)細(xi)胞的(de)增(zeng)殖(zhi)和分化(hua)的調(tiao)控(kong)。

 

　　NIBSC93/722白(bai)介素(su)10劑盒采用(yong)雙抗(kang)體(ti)夾(jia)心(xin)ELISA法(fa)檢(jian)測(ce)樣本中IL-10 的(de)濃(nong)度。IL-10 捕(bu)獲(huo)抗(kang)體(ti)已(yi)預(yu)包被於(yu)酶(mei)標(biao)板(ban)上(shang)，當加(jia)入標(biao)本或(huo)參考品時(shi)，其中(zhong)的IL-10 會與捕(bu)獲抗(kang)體(ti)結(jie)合(he)，其它(ta)遊(you)離(li)的成分通(tong)過(guo)洗(xi)滌的過(guo)程被除去。當加(jia)入生物(wu)素(su)化(hua)的抗(kang)人(ren)IL-10 抗(kang)體(ti)後，抗人(ren)IL-10 抗(kang)體(ti)與(yu)IL-10 接合(he)，形成(cheng)夾(jia)心(xin)的免(mian)疫復合(he)物，其(qi)它(ta)遊(you)離(li)的成分通(tong)過(guo)洗(xi)滌的過(guo)程被除去。隨(sui)後加(jia)入辣根(gen)過(guo)氧化(hua)物酶(mei)標(biao)記的(de)親(qin)合(he)素(su)。

 

　　生物(wu)素(su)與親(qin)合(he)素(su)特異(yi)性(xing)結合(he)，親(qin)合(he)素(su)連接的酶(mei)就會與夾(jia)心的(de)免(mian)疫復合(he)物連(lian)接起(qi)來；其它遊(you)離(li)的成分通(tong)過(guo)洗(xi)滌的過(guo)程被除去。加(jia)入顯色劑，若樣(yang)本中存(cun)在(zai)IL-10 將會形成(cheng)免(mian)疫復合(he)物，辣(la)根(gen)過(guo)氧化(hua)物酶(mei)會催化(hua)無色的(de)顯(xian)色劑氧化(hua)成藍(lan)色物(wu)質(zhi)，在(zai)加(jia)入中止(zhi)液後呈(cheng)黃(huang)色。通(tong)過(guo)酶標(biao)儀檢(jian)測(ce)，讀其(qi)450nm處的OD值(zhi)，IL-10 濃(nong)度與(yu)OD450值(zhi)之間呈(cheng)正比(bi)，通(tong)過(guo)參考品繪制標(biao)準曲線，對照未知樣本中OD值(zhi)，即可算出(chu)標(biao)本中IL-10 濃(nong)度。