轉基因(yin)玉米(mi)Bt11標(biao)準物(wu)質(zhi)ERM-BF412dk穩(wen)定性(xing)測定分析(xi)

轉基因(yin)玉米(mi)Bt11標(biao)準物(wu)質(zhi)ERM-BF412dk是(shi)含有不(bu)同質量分數(shu)的(de)轉基因(yin)玉米(mi)的(de)五(wu)種(zhong)Bt11玉米(mi)粉(fen)末認證參考(kao)物(wu)質(zhi)(CRMs)之(zhi)壹。轉基因(yin)玉米(mi)Bt11標(biao)準物(wu)質(zhi)ERM-BF412dk應(ying)用(yong)於(yu)食品(pin)和飼(si)料(liao)中(zhong)轉基因(yin)Bt11玉米(mi)的(de)鑒(jian)定和(he)定量(liang)方(fang)法的(de)校準或質(zhi)量(liang)控(kong)制(zhi)。幹的(de)CRM粉具(ju)有(you)吸(xi)濕(shi)性(xing)。

轉基因(yin)玉米(mi)Bt11標(biao)準物(wu)質(zhi)ERM-BF412dkddPCR方(fang)法穩定(ding)性(xing)測定分析(xi)

以(yi)10 ng/μL的(de)轉基因(yin)玉米(mi)Bt11標(biao)準物(wu)質(zhi)基因(yin) 組(zu) DNA 為模板(ban)進行 ddPCR，測定轉(zhuan)基因(yin)玉米(mi) Bt11 品(pin)系(xi)穩(wen)定性(xing)。ddPCR 擴增(zeng)反(fan)應的(de)熱點(dian)圖(tu)(圖(tu) 1)顯 示，ddPCR所(suo)獲(huo)得的(de)陰性(xing)微滴和陽性(xing)微滴之(zhi)間有明 顯的(de)熒光(guang)信(xin)號(hao)差距，拖(tuo)尾現象(xiang)不嚴重，通(tong)過(guo)設(she)置統 壹的(de)閾值(zhi)線(xian)可進行陰性(xing)和陽性(xing)反應點(dian)的(de)區(qu)分。各(ge) 微滴(di)實驗(yan)結果的(de)數據(ju)分析(xi)(表3)顯示，3次重復(fu)擴增(zeng) 實驗(yan)微滴(di)數都(dou)大(da)於(yu) 14 000，滿足泊(bo)松(song)分布統計(有 效微滴數(shu)＞10000)的(de)要(yao)求，說明實驗(yan)數據(ju)具有統(tong)計 學(xue)意義。內參基因(yin) Zein 的(de) 3 次重復(fu)實驗(yan)基因(yin)拷(kao)貝 數(shu)分別(bie)為 161、160 和(he) 166，平均拷(kao)貝數(shu)為 162.33， RSD 為 1.98%；Bt11 品(pin)系(xi)特(te)異(yi)性(xing)基因(yin)的(de) 3 次擴增(zeng)反(fan) 應所(suo)得(de)的(de)拷(kao)貝數(shu)分別(bie)為86.20、81.30和(he)83.90，平均拷(kao)貝數(shu)為83.80，RSD為2.93%。上(shang)述(shu)結果表明，本(ben) 方(fang)法中所(suo)用(yong)內源(yuan)和(he)外(wai)源(yuan)基因(yin)引物(wu)和(he)探針的(de)擴增(zeng)穩(wen) 定性(xing)良好(hao)，可同時進行轉基因(yin)玉米(mi)Bt11 品(pin)系(xi)特(te)異(yi) 性(xing)序列及內源(yuan)基因(yin)的(de)ddPCR檢測(ce)。

東(dong)莞(guan)市(shi)百(bai)順(shun)生(sheng)物(wu)科技(ji)有(you)限(xian)公司是BCR/IRMM/ERM的(de)代理(li)商(shang)，專業(ye)代(dai)理(li) 轉(zhuan)基因(yin)玉米(mi)Bt11標(biao)準物(wu)質(zhi)ERM-BF412dk標(biao)準品(pin)。