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您(nin)的(de)位置:網(wang)站首頁(ye) > 技術文章 > ERM-BF427d 98140玉(yu)米(mi)標準(zhun)品(pin)材(cai)料(liao)特(te)性簡介 98140 玉(yu)米(mi)是由(you)杜(du)邦(bang)先(xian)鋒(feng)公(gong)司研發的抗(kang)蟲(chong)耐(nai)除(chu)草劑轉基(ji)因(yin)品(pin)種,通過農桿(gan)菌轉(zhuan)化法轉(zhuan)入cry1F 基(ji)因(yin)(編(bian)碼(ma) Cry1F 毒蛋白,抗(kang)鱗翅(chi)目害蟲(chong)如(ru)歐洲(zhou)玉(yu)米(mi)螟)和(he)pat 基(ji)因(yin)(編(bian)碼(ma)草胺(an)膦(lin)乙酰(xian)轉移(yi)酶,耐(nai)草(cao)胺(an)膦(lin)類除(chu)草劑),已(yi)在(zai)全(quan)球(qiu) 20 余個(ge)國(guo)家(jia) / 地(di)區(qu)獲(huo)批(pi)種(zhong)植或進(jin)口,其中(zhong)美(mei)國(guo)、加(jia)拿大批準用於食品(pin) / 飼料(liao)加(jia)工(gong),中國(guo)批準(zhun)作(zuo)為(wei)加(jia)工(gong)原料(liao)(農業(ye)部 2017 年(nian)第(di) 2578 號公告(gao))。
當前轉基(ji)因(yin)玉(yu)米(mi)檢(jian)測(ce)存(cun)在(zai)兩(liang)大核(he)心痛(tong)點(dian):壹是(shi)不同(tong)檢(jian)測(ce)平臺(如(ru) qPCR、dPCR)的引物(wu)探針(zhen)設(she)計(ji)差(cha)異(yi),導(dao)致同壹(yi)樣(yang)品(pin)檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)偏差(cha)可(ke)達(da) 18%-25%(如(ru)歐盟(meng)聯合(he)實驗室(shi)比(bi)對數(shu)據(ju));二是(shi)缺(que)乏基(ji)質(zhi)匹配(pei)的(de)可(ke)溯源標準品(pin),造成跨境貿(mao)易中(zhong) “閾值(zhi)判定(ding)爭議"(如(ru)歐盟(meng) 0.9% 標簽(qian)閾值(zhi))。為(wei)此(ci),歐(ou)盟(meng)聯合(he)研(yan)究(jiu)中(zhong)心參(can)考(kao)物(wu)質(zhi)與測(ce)量(liang)研究(jiu)所(suo)(JRC-IRMM)研(yan)制(zhi) ERM-BF427d,作為全球(qiu)的首l個(ge) 98140 玉(yu)米(mi)有證(zheng)參考(kao)物(wu)質(zhi)(CRM),ERM-BF427d 98140玉米(mi)標準(zhun)品(pin)旨在(zai)統壹(yi)檢(jian)測(ce)體(ti)系(xi)量值(zhi)溯(su)源(yuan)鏈,支撐食品(pin)飼料(liao)標簽(qian)合(he)規、跨境(jing)貿(mao)易互(hu)認及轉基(ji)因(yin)監(jian)管(guan)執法。
物(wu)質(zhi)特(te)性與(yu)分(fen)子(zi)基(ji)礎(chu)
1. 分子(zi)靶(ba)標(biao)特(te)征
該(gai)ERM-BF427d 98140玉(yu)米(mi)標準(zhun)品(pin)靶向(xiang) 98140 玉(yu)米(mi)的兩(liang)個(ge)核(he)心外(wai)源(yuan)基(ji)因(yin)片段(duan),均(jun)匹(pi)配(pei)國(guo)際標(biao)準(zhun)化(hua)組(zu)織(ISO)及(ji)各國(guo)監管(guan)機(ji)構(gou)推(tui)薦的(de)檢(jian)測(ce)靶(ba)標:
cry1F 基(ji)因(yin):源(yuan)自蘇(su)雲金桿菌,編(bian)碼(ma)的 Cry1F 毒(du)蛋白可特(te)異性(xing)結(jie)合(he)害蟲(chong)中(zhong)腸(chang)受體(ti),基(ji)因(yin)片段(duan)長度(du) 492 bp,與其他(ta)抗(kang)蟲(chong)基(ji)因(yin)(如(ru) cry1Ab、cry2Ab)同源(yuan)性<10%,避免交叉(cha)反應(ying);
pat 基(ji)因(yin):源(yuan)自鏈黴菌,編(bian)碼(ma)的酶(mei)可降解(jie)草胺(an)膦(lin),基(ji)因(yin)片段(duan)長度(du) 327 bp,符合歐(ou)盟(meng)委員(yuan)會(hui)法規(EC)No 641/2004 規定的(de)定(ding)性檢(jian)測(ce)靶(ba)標序列。
兩(liang)基(ji)因(yin)的(de)側(ce)翼序(xu)列均(jun)為(wei)玉(yu)米(mi)基(ji)因(yin)組(zu)片段(duan)(Zm-adh1 啟動子(zi)、nos 終止子(zi)),確(que)保(bao)檢(jian)測(ce)特(te)異性(xing)。
2. 物(wu)質(zhi)形態(tai)與組成
ERM-BF427d 98140玉米(mi)標準(zhun)品(pin)采(cai)用凍幹(gan)粉(fen)末形態(tai)(天然(ran)玉(yu)米(mi)基(ji)質(zhi)載體),溶(rong)解(jie)後為均(jun)壹(yi)混(hun)懸(xuan)液,標準(zhun)儲存液組成如(ru)下:
活(huo)性成分:98140 玉米(mi)基(ji)因(yin)組(zu) DNA(純度(du)≥97%,瓊(qiong)脂糖(tang)電泳(yong)無降解(jie));
基(ji)質(zhi)載體:非轉基(ji)因(yin)玉(yu)米(mi)粉(fen)(含(han) 1.2% 玉(yu)米(mi)蛋白、0.3% 膳食纖維,模(mo)擬實際(ji)檢(jian)測(ce)基(ji)質(zhi));
緩沖體系(xi):20 mmol/L Tris-HCl(pH 8.5)、2 mmol/L EDTA(螯(ao)合(he)金屬離子(zi),保(bao)護(hu) DNA);
穩(wen)定劑:8%(w/v)蔗糖(tang)(防(fang)止凍幹(gan)過程(cheng)中(zhong) DNA 變(bian)性(xing))。
整套標(biao)準品(pin)含(han) 4 個(ge)濃度(du)梯度(du)(ERM-BF427d1-d4),覆蓋轉基(ji)因(yin)檢(jian)測(ce)全(quan)量程(cheng)需(xu)求(qiu):
編(bian)號 | 轉基(ji)因(yin)成分含(han)量(liang)(%) | 擴(kuo)展(zhan)不確(que)定度(du)(k=2) |
ERM-BF427d1 | 10.0 | ±0.9 |
ERM-BF427d2 | 1.0 | ±0.13 |
ERM-BF427d3 | 0.1 | ±0.016 |
ERM-BF427d4 | 0.01 | ±0.002 |
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